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?NIH-3T3(小鼠胚胎成纖維細胞)

貨號: GC080100412

規(guī)格:1×106cell/T25培養(yǎng)瓶

價格:¥800.00

生長培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS+1%PS

產(chǎn)品描述
         NIH-3T3(小鼠胚胎成纖維細胞)通過克隆3T3(swiss小鼠)細胞得到的連續(xù)亞株,細胞表達胰島素。當3T3-L1細胞從快速分裂到長滿且接觸抑制時,細胞從前脂肪向脂肪樣逆轉(zhuǎn)。高血清含量的培養(yǎng)液可以促進3T3-L1細胞內(nèi)脂肪的積累。3T3-L1細胞可用于研究與糖尿病、肥胖和相關(guān)疾病相關(guān)的基本細胞機制。檢測表明,3T3-L1細胞鼠痘病毒呈陰性。
 
基本信息
細胞別稱 NIH/3T3; NIH-3T3; NIH3T3; 3T3; 3T3NIH; 3T3-Swiss; Swiss-3T3; Swiss/3T3; Swiss 3T3; Swiss3T3
細胞來源 小鼠
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
細胞類型 自發(fā)永生化細胞
生長特性 貼壁細胞
安全等級 BSL1
包裝規(guī)格 T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時間 2~3天
傳代比例 1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1658 ATCC; CRL-6442DSMZ; ACC-59 ECACC; 93061524

【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系DMEM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
【傳代步驟】
細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
(1).棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次;
(2).1ml消化液于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化;
(3).用巴氏管輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加入培養(yǎng)液后吹勻;
(4).收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:4的比例進行。
【凍存步驟】
1).細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù);
2).5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識;
3).將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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