服務內(nèi)容
根據(jù)客戶提供的基因ID號檢索對應的基因啟動子區(qū),根據(jù)相關數(shù)據(jù)庫預測啟動子核心區(qū)及序列;
以預測的啟動序列為模板,設計特異性引物,擴增啟動子序列;
根據(jù)客戶要求將啟動子序列重組到對應的質(zhì)粒載體上。
服務流程
交付內(nèi)容
提供重組載體(一般為克隆載體)及甘油菌株;
提供重組載體實驗技術報告(包括酶切鑒定 以及測序分析結果);
案例:hMicroRNA126啟動子克隆案例
1. 實驗步驟
(1) 采用ensemble數(shù)據(jù)庫和其他相關啟動子預測數(shù)據(jù)庫獲得MicroRNA126啟動子核心序列;
(2) 根據(jù)預測的啟動子序列設計PCR擴增引物;
(3) 以人源細胞系293細胞基因組為模板進行PCR擴增;
(4) 采用無縫克隆技術將MicroRNA126啟動子序列連接到pGL4.10載體上
2. 實驗結果
pGL4.10-MicroRNA126promoter雙酶切鑒定如下圖: