服務簡介
在生物體內(nèi)DNA的轉錄是基因表達的關鍵過程,基因表達調(diào)控主要發(fā)生在轉錄水平?;蝽樖阶饔迷▎幼樱┖娃D錄因子相互作用,對基因的調(diào)控表達,將直接影響下游信號通路功能的實現(xiàn)?;蛘{(diào)控的研究將是今后相當長一段時間內(nèi)功能基因組學研究的熱點之一。雙熒光素酶報告基因檢測(Dual- Luciferase reporter assay,DR)已成為研究轉錄因子參與基因調(diào)控的有效手段,通過對啟動子DNA片段的分析,驗證啟動子結合元件的反式激活能力,探討轉錄因子在信號轉導中的分子機制。
服務內(nèi)容
啟動子預測:
根據(jù)客戶提供的基因ID號檢索目的基因的啟動子區(qū),根據(jù)相關軟件預測和分析啟動子核心區(qū)及序列;
啟動子熒光載體構建:
以預測的啟動子核心區(qū)序列為模板設計特異性引物,PCR擴增啟動子序列,構建啟動子的重組熒光基因報告載體(pGL3或pGL4.10);
細胞轉染和熒光值檢測:
啟動子熒光基因載體與對應轉錄因子表達載體共轉染目標細胞(例如293細胞),轉染48小時進行雙熒光值檢測;
服務流程
交付內(nèi)容
提供啟動子熒光重組載體及甘油菌株;
提供雙熒光基因報告實驗技術報告(包括實驗步驟,載體構建,熒光基因報告實驗結果);