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CHO(中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)

貨號(hào):GC080100396

規(guī)格:1×106cell/T25培養(yǎng)瓶

價(jià)格:¥1200.00

生長(zhǎng)培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS+1%PS

產(chǎn)品描述
       CHO細(xì)胞又稱(chēng)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(Chinese Hamster Ovary),1957年美國(guó)科羅拉多大學(xué)Dr. Theodore T. Puck從一成年雌性倉(cāng)鼠卵巢分離獲得,是一種來(lái)源于中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢的上皮細(xì)胞系。
       CHO細(xì)胞屬于成纖維細(xì)胞,是一種非分泌型細(xì)胞,它本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白,因此對(duì)目標(biāo)蛋白分離純化工作十分有利。可形成有活性的二聚體(如白介素2),具有糖基化的功能(如EPO), CHO為表達(dá)復(fù)雜生物大分子的理想宿主。該細(xì)胞存在遺傳缺陷,無(wú)脯氨酸合成基因,不能將谷氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)楣劝彼?半醛,培養(yǎng)過(guò)程中需在培養(yǎng)基中添加L-脯氨酸才能生長(zhǎng)。并且由于該細(xì)胞已經(jīng)霍亂毒素適應(yīng),形態(tài)學(xué)有所改變。最初細(xì)胞為貼壁型細(xì)胞,經(jīng)多次傳代篩選后,也可懸浮生長(zhǎng)。
 
基本信息
細(xì)胞別稱(chēng) CHO
細(xì)胞來(lái)源 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞類(lèi)型 正常細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
安全等級(jí) BSL1
包裝規(guī)格 T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時(shí)間 2~3天
傳代比例 1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
保藏機(jī)構(gòu) ATCC

【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系DMEM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
【傳代步驟】
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
(1).棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次;
(2).1ml消化液于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化;
(3).用巴氏管輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加入培養(yǎng)液后吹勻;
(4).收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:4的比例進(jìn)行。
【凍存步驟】
1).細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù);
2).5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí);
3).將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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