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RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)

貨號(hào):GC080100394

規(guī)格:1×106cell/T25培養(yǎng)瓶

價(jià)格:¥1200.00

生長(zhǎng)培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS+1%PS

產(chǎn)品描述
       RAW264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞),是由加利福尼亞索爾克研究所的W. C. Raschke在雄性BAB/14小鼠腹腔注射A-MuLV(Abelson鼠科白血病病毒)誘發(fā)腫瘤的腹水中建立的,是最常見(jiàn)的炎癥細(xì)胞模型之一。RAW264.7細(xì)胞一般為圓形或橢圓形,顏色較深,貼壁牢固。RAW264.7細(xì)胞具有較強(qiáng)的吞噬能力,在吞噬抗原后,細(xì)胞會(huì)釋放出趨化因子,促使分化,細(xì)胞伸出偽足,攀爬能力增強(qiáng)。
 
基本信息
細(xì)胞別稱 RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7
細(xì)胞來(lái)源 單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 半貼壁細(xì)胞
安全等級(jí) BSL1
包裝規(guī)格 T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時(shí)間 2~3天
傳代比例 1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
保藏機(jī)構(gòu) ATCC

【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系DMEM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
【傳代步驟】
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
(1).棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次;
(2).1ml消化液于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化;
(3).用巴氏管輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加入培養(yǎng)液后吹勻;
(4).收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:4的比例進(jìn)行。
【凍存步驟】
1).細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù);
2).5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí);
(3).將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
提示:

1.細(xì)胞半貼壁圓形或多角形生長(zhǎng),部分懸浮圓形,傳代時(shí)均可收集培養(yǎng),換液時(shí)將懸浮細(xì)胞離心收集后重新接回原瓶,若貼壁細(xì)胞較多活性較好時(shí)可以不要懸浮的細(xì)胞;
2.在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞吞噬抗原過(guò)多、培養(yǎng)條件惡劣或傳代后細(xì)胞稀疏等情況,都會(huì)使細(xì)胞呈現(xiàn)出梭形、長(zhǎng)梭形的形態(tài),消化難度增加。
3.該細(xì)胞對(duì)胰酶比較敏感,胰酶消化后細(xì)胞形態(tài)會(huì)更多梭形,貼壁變緊,傳代不建議使用胰酶消化該細(xì)胞;
4.該細(xì)胞生長(zhǎng)較快,培養(yǎng)基消耗較快,培養(yǎng)時(shí)注意密切關(guān)注細(xì)胞狀態(tài),密度較高、培養(yǎng)基有變黃趨勢(shì)時(shí)及時(shí)換液避免細(xì)胞狀態(tài)變差。
STR鑒定