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Detroit 562 (人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞)

貨號:GC080100389

規(guī)格:1×106cell/T25培養(yǎng)瓶

價格:¥1200.00

生長培養(yǎng)基:MEM+10%FBS+1%PS

產(chǎn)品描述
      Detroit 562 (人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞)細(xì)胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
 
基本信息
細(xì)胞別稱 DETROIT 562; Detroit-562; Detroit562; DETROIT562; Det 562; Det. 562; D562
細(xì)胞來源 咽頭
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
安全等級 BSL1
包裝規(guī)格 T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時間 2~3天
傳代比例 1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
保藏機構(gòu) ATCC; CCL-138 ATCC; CRL-7919ECACC; 87042205

【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系MEM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
【傳代步驟】
當(dāng)細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
(1).棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次;
(2).1ml消化液于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化;
(3).用巴氏管輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加入培養(yǎng)液后吹勻;
(4).收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:4的比例進行。
【凍存步驟】
1).細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù);
2).5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識;
3).將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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