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SJSA-1 (人骨肉瘤細(xì)胞)
貨號:
GC080100374
規(guī)格:
1×10
6
cell/T25培養(yǎng)瓶
價格:
¥1200.00
生長培養(yǎng)基:
RPMI-1640
+
10%FBS
+
1%PS
說明書
產(chǎn)品描述
SJSA-1 (人骨肉瘤細(xì)胞)(以前稱為 OsA-CL)于1982年從一名被診斷患有股骨原始多能肉瘤的患者的原發(fā)腫瘤中建立。
基本信息
細(xì)胞別稱
SJSA-1、OsA-CL
細(xì)胞來源
股骨原始多能肉瘤
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞類型
腫瘤細(xì)胞
生長特性
貼壁細(xì)胞
安全等級
BSL1
包裝規(guī)格
T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時間
2~3天
傳代比例
1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
保藏機(jī)構(gòu)
AddexBio; C0004004/64ATCC; CRL-2098CCTCC; GDC0257
【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系
:
RPMI-1640
+10%FBS
+1%PS
培養(yǎng)條件
:
氣相
:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件
:
基礎(chǔ)培養(yǎng)基
+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
【傳代步驟】
當(dāng)
細(xì)胞密度達(dá)
80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
(1).
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的
PBS潤洗細(xì)胞1-2次;
(2).
加
1
ml消化液于培養(yǎng)瓶中,置于37
℃
培養(yǎng)箱中消化
2-4
分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加
胰酶
3倍體積的
培養(yǎng)基終止消化;
(3).
用巴氏管
輕輕打勻后吸出,在
1000RPM條件下離心
5
分鐘,棄去上清液,
加入
培養(yǎng)液后吹勻;
(4).
收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按
1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:4的比例進(jìn)行。
【凍存步驟】
(
1).細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù);
(
2).5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識;
(
3).將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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