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產(chǎn)品描述

A-375(人惡性黑色素瘤細胞)源自患有惡性黑色素瘤的女性患者的皮膚，是由D·J·Giard等人建立的一系列細胞株中的一株。A-375細胞在抗胸腺細胞球蛋白、血清處理的NIH瑞士小鼠中形成類似于惡性黑素瘤的快速增長的皮下腫瘤，A-375細胞可以在普通成纖維細胞飼養(yǎng)層和瓊脂上形成克隆。A-375細胞是NRAS mutant-A375 isogenic理想對照，可用于3D細胞培養(yǎng)、高通量篩選、毒理學和免疫腫瘤學研究，也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。

基本信息

細胞別稱	A 375; A375; A375-MEL; A375-mel; A375mel
細胞來源	皮膚
細胞形態(tài)	上皮細胞樣
細胞類型	腫瘤細胞
生長特性	貼壁細胞
安全等級	BSL1
包裝規(guī)格	T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時間	2~3天
傳代比例	1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
保藏機構(gòu)	ATCC;CRL-1619 ATCC;CRL-1619 BCRC;60039 BCRJ;0278

【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系：DMEM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件：氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件：基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS，液氮保存
【傳代步驟】
當細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
(1).棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次；
(2).加1ml消化液于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化；
(3).用巴氏管輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入培養(yǎng)液后吹勻；
(4).收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:4的比例進行。
【凍存步驟】
（1）.細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)；
（2）.5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識；
（3）.將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

STR鑒定

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? A-375(人惡性黑色素瘤細胞)