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產(chǎn)品描述

NK-92細(xì)胞是一種白細(xì)胞介素-2 (IL-2) 依賴性自然殺傷細(xì)胞系， 1992年建立于一名患有快速進(jìn)展性非霍奇金淋巴瘤的 50 歲白人男性的外周血單核細(xì)胞。NK-92細(xì)胞對(duì)很多惡性細(xì)胞有細(xì)胞毒性；鉻釋放試驗(yàn)顯示它能殺死K562細(xì)胞和Daudi細(xì)胞。NK-92細(xì)胞(經(jīng)過(guò)照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的體外免疫清掃而不危及血細(xì)胞的功能。NK-92細(xì)胞有以下特征：CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面標(biāo)記陽(yáng)性；CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面標(biāo)記陰性。

基本信息

細(xì)胞別稱	NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK
細(xì)胞來(lái)源	NK細(xì)胞；淋巴瘤/白血病；男性；50歲
細(xì)胞形態(tài)	淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞類型	腫瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性	懸浮細(xì)胞
安全等級(jí)	BSL2
包裝規(guī)格	T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時(shí)間	2~3天
傳代比例	1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）
保藏機(jī)構(gòu)	ATCC; CRL-2407；CCTCC; GDC0052；DSMZ; ACC-488

【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系：α-MEM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件：氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS，液氮保存
【傳代步驟】
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
(1).棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次；
(2).加1ml消化液于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化；
(3).用巴氏管輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入培養(yǎng)液后吹勻；
(4).收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:4的比例進(jìn)行。
【凍存步驟】
（1）.細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；
（2）.5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)；
（3）.將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取

STR鑒定

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NK92（人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞）