| 細胞別稱 |
HUVEC |
| 細胞來源 |
人臍帶組織 |
| 細胞形態(tài) |
內(nèi)皮細胞樣 |
| 細胞類型 |
正常細胞 |
| 生長特性 |
貼壁生長 |
| 安全等級 |
|
| 包裝規(guī)格 |
T25瓶或者1mL凍存管包裝 |
| 倍增時間 |
2~3天 |
| 傳代比例 |
1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定） |
【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系：DMEM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件：氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS，液氮保存
【傳代步驟】
當細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次；
2.加1ml消化液于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化；
3.用巴氏管輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入培養(yǎng)液后吹勻；
4.收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:4的比例進行。
【凍存步驟】
a.細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)；
b.5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識；
c.將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
