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產(chǎn)品描述

PK-15細胞是豬腎傳代細胞系,其父母代源自1955年美國Stice提供的成年豬腎細胞PK-2a,后被美國ATCC收藏(收藏號為ATCC—CCL33)。該細胞具有貼壁依賴性,能分泌纖溶酶原活化因子和角蛋白。目前,PK-15細胞現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于豬瘟病毒(CSFV)、豬偽狂犬病病毒、豬細小病毒(PPV)等的分離、體外增殖以及多種獸用疫苗的生產(chǎn)。

基本信息

細胞別稱	PK(15); PK (15); PK 15; PK15; Porcine Kidney-15
細胞來源	豬腎
細胞形態(tài)	上皮細胞樣
細胞類型	正常細胞；自發(fā)永生化
生長特性	貼壁細胞
安全等級	BSL1
包裝規(guī)格	T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時間	2~3天
傳代比例	1:2-1:3（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
保藏機構(gòu)	ATCC

【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系：DMEM+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件：氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS，液氮保存
【傳代步驟】
當細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
(1).棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次；
(2).加1ml消化液于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化；
(3).用巴氏管輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入培養(yǎng)液后吹勻；
(4).收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:4的比例進行。
【凍存步驟】
（1）.細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)；
（2）.5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識；
（3）.將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

STR鑒定

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PK15(豬腎細胞)