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MCF-7(人乳腺癌細胞)
貨號:
GC080100352
規(guī)格:
1×10
6
cell/T25培養(yǎng)瓶
價格:
¥1200.00
生長培養(yǎng)基:
MEM(含NEAA)
+
10%FBS
+
1%PS
說明書
產(chǎn)品描述
該細胞是從一名
69歲的白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離建立的。該細胞保留了多個分化乳腺上皮的特性,包括:能通過胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成隆突結(jié)構(gòu)(domes);該細胞表達WNT7B癌基因;TNF-α可以抑制MCF-7細胞的生長;抗雌激素處理能調(diào)節(jié)細胞胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(IGFBP)的分泌。
基本信息
細胞別稱
MCF 7; MCF.7; MCF7; Michigan Cancer Foundation-7; ssMCF-7; ssMCF7; MCF7/WT; MCF7-CTRL; IBMF-7
細胞來源
浸潤性導管癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;女性
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
生長特性
貼壁生長
安全等級
BSL1
包裝規(guī)格
T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時間
2~3天
傳代比例
1:2-1:3(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系
:MEM(含NEAA)
+10%FBS
+1%PS
培養(yǎng)條件
:
氣相
:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件
:
基礎(chǔ)培養(yǎng)基
+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
【傳代步驟】
當
細胞密度達
80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
(1).
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的
PBS潤洗細胞1-2次;
(2).
加
1
ml消化液于培養(yǎng)瓶中,置于37
℃
培養(yǎng)箱中消化
2-4
分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加
胰酶
3倍體積的
培養(yǎng)基終止消化;
(3).
用巴氏管
輕輕打勻后吸出,在
1000RPM條件下離心
5
分鐘,棄去上清液,
加入
培養(yǎng)液后吹勻;
(4).
收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按
1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:4的比例進行。
【凍存步驟】
(
1).細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù);
(
2).5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識;
(
3).將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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