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產(chǎn)品描述

HT-29細(xì)胞系是1964年由福格用外植體培養(yǎng)法從原發(fā)腫瘤中分離出來(lái)的。HT-29細(xì)胞表達(dá)尿激酶受體，但沒(méi)有檢測(cè)到血漿酶原活性。HT-29 細(xì)胞CD4表達(dá)陰性，但細(xì)胞表面表達(dá)半乳糖神經(jīng)酰胺（一個(gè)HIV的可替代受體）。致癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos表達(dá)陽(yáng)性，過(guò)量產(chǎn)生p53抗原，在p53基因的273密碼子處有G->A突變導(dǎo)致Arg->His替換，未檢測(cè)到致癌基因N-myc的表達(dá)。HT-29細(xì)胞可以用于3D細(xì)胞培養(yǎng)、高通量篩選、癌癥研究和毒理學(xué)研究，也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。

基本信息

細(xì)胞別稱	HT 29; HT29
細(xì)胞來(lái)源	結(jié)腸腺癌；女性
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類(lèi)型	腫瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)
安全等級(jí)	BSL1
包裝規(guī)格	T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時(shí)間	2~3天
傳代比例	1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）
保藏機(jī)構(gòu)	ATCC; HTB-38 BCRJ; 0111 CCLV; CCLV-RIE 0960 DSMZ; ACC-299 ECACC; 91072201

【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系：RPMI-1640+10%FBS+1%PS
培養(yǎng)條件：氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS，液氮保存
【傳代步驟】
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
(1).棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次；
(2).加1ml消化液于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-4分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶3倍體積的培養(yǎng)基終止消化；
(3).用巴氏管輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加入培養(yǎng)液后吹勻；
(4).收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:4的比例進(jìn)行。
【凍存步驟】
（1）.細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；
（2）.5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)；
（3）.將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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HT29(人結(jié)腸癌細(xì)胞)