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A7R5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞)
貨號:
GC080100353
規(guī)格:
1×10
6
cell/T25培養(yǎng)瓶
價格:
¥1200.00
生長培養(yǎng)基:
DMEM
+
10%FBS
+
1%PS
說明書
產品描述
A7r5
是一種常見的大鼠主動脈平滑肌細胞,
培養(yǎng)到穩(wěn)定期后,表現出長高的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性
(CPK);A7r5細胞分裂終止后合成骨肉型CPK。
廣泛用于心血管疾病和相關疾病的發(fā)病機制。
基本信息
細胞別稱
A7R5
細胞來源
大鼠胸大動脈平滑肌
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
細胞類型
自發(fā)永生化細胞
生長特性
貼壁生長
安全等級
BSL1
包裝規(guī)格
T25瓶或者1mL凍存管包裝
倍增時間
2~3天
傳代比例
1:2-1:3(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
保藏機構
ATCC; CRL-1444 ECACC; 86050803
【培養(yǎng)保存】
培養(yǎng)體系
:
DMEM
+10%FBS
+1%PS
培養(yǎng)條件
:
氣相
:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃
凍存條件
:
基礎培養(yǎng)基
+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
【傳代步驟】
當
細胞密度達
80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
(1).
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的
PBS潤洗細胞1-2次;
(2).
加
1
ml消化液于培養(yǎng)瓶中,置于37
℃
培養(yǎng)箱中消化
2-4
分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加
胰酶
3倍體積的
培養(yǎng)基終止消化;
(3).
用巴氏管
輕輕打勻后吸出,在
1000RPM條件下離心
5
分鐘,棄去上清液,
加入
培養(yǎng)液后吹勻;
(4).
收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按
1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。
【凍存步驟】
(
1).細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數;
(
2).5min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識;
(
3).將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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