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MPC-5細(xì)胞(小鼠腎足細(xì)胞)

貨號:GC081001539

規(guī)格:1×106cell/T25培養(yǎng)瓶

價(jià)格:¥1200.00

生長培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS+1%PS

產(chǎn)品描述

MPC-5細(xì)胞(小鼠腎足細(xì)胞)是通過使用編碼SV40LT的溫度敏感轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)染來實(shí)現(xiàn)永生化的,是一種研究足細(xì)胞分化和過程形成的決定性步驟的細(xì)胞系。研究人員可以利用基因編輯技術(shù)(如CRISPR-Cas9)在MPC-5細(xì)胞中敲除或敲低特定基因,從而觀察這些基因?qū)?xì)胞功能的影響。


基本信息

細(xì)胞別稱

MPC-5

細(xì)胞來源

腎足細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞類型

正常細(xì)胞

生長特性

貼壁細(xì)胞

安全等級

BSL2

包裝規(guī)格

T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝

倍增時(shí)間

2~3

傳代比例

1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)

保藏機(jī)構(gòu)

ATCC


【培養(yǎng)保存】

培養(yǎng)體系:DMEM+10%FBS+1%PS

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃

凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS,液氮保存


【傳代步驟】

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次;

2. 加 1ml 消化液于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 2-4 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加胰酶 3 倍體積的培養(yǎng)基終止消化;

3. 用巴氏管輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘,棄去上清液,加入培養(yǎng)液后吹勻;

4. 收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按 1:2 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按 1:2 到 1:4 的比例進(jìn)行。


【凍存步驟】

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入 3ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù);

2. 5min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和 DMSO,輕輕混勻, DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于 1x10(6)/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識;

將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,至少 2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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