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BJ5183-AD-1感受態(tài)細(xì)胞

貨號(hào)：GC080100292

規(guī)格：10×100μL

價(jià)格：￥480.00

產(chǎn)品用途：質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、重組

產(chǎn)品描述

BJ5183-AD-1菌株攜帶的pAdEasy-1質(zhì)粒包含了大部分人腺病毒5型的基因組序列（E1 /E3基因缺失），可直接用于轉(zhuǎn)化Adeasy系統(tǒng)的穿梭質(zhì)粒，產(chǎn)生重組腺病毒質(zhì)粒。pAdEasy -1為 33.477kb，具有氨芐青霉素抗性，與穿梭載體重組后抗性消失。感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)本公司特有工藝制作，卡那霉素抗性的pAdTrack-CMV質(zhì)粒檢測(cè)感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率大于10³cfu/μg。
【基因型】
endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (StrR)
【菌株抗性】
對(duì)卡那霉素敏感，有鏈霉素和氨芐青霉素抗性。
【質(zhì)粒轉(zhuǎn)化步驟】
1.將感受態(tài)細(xì)胞置于冰上解凍，待細(xì)胞解凍后，加入目的質(zhì)粒（含有線性化目的基因）到細(xì)胞中，槍頭輕輕混勻2次；
2.冰上靜置 30 分鐘；
3.42℃熱擊 90 秒鐘；
4.冰上放置 3 分鐘；
5.加入 500μl 無(wú)菌的 LB 培養(yǎng)基；
6.置于 37℃搖床中，100rpm 震蕩復(fù)蘇培養(yǎng) 60 分鐘；
7.復(fù)蘇后5000rpm離心3分鐘，棄掉多余液體留 50-100μl 混勻后涂布在含有卡那霉素抗性的 LB 平板上。待液體涂干后，倒置平板，37℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí)。
【注意事項(xiàng)】
1.感受態(tài)細(xì)胞冰上融化；
2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中輕柔操作；
3.請(qǐng)勿反復(fù)凍融。

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