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Stbl3感受態(tài)細(xì)胞

貨號(hào)：GC080100575

規(guī)格：10×100μL

價(jià)格：￥260.00

產(chǎn)品用途：質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、重組

產(chǎn)品描述

Stbl3感受態(tài)細(xì)胞來(lái)源大腸桿菌HB101菌株，基因組含重組酶recA13突變，可有效抑制長(zhǎng)片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯(cuò)誤重組的概率。本菌株非常穩(wěn)定，和常見(jiàn)的大腸桿菌菌株相比，對(duì)于慢病毒載體等較大質(zhì)粒或其它不穩(wěn)定載體的轉(zhuǎn)化效率以及克隆和擴(kuò)增的穩(wěn)定性有顯著提高。經(jīng)本公司特有工藝制備，使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)10⁸ cfu/µgDNA。
【基因型】
F- mcrB mrr hsdS20 (rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2rpsL20(StrR) xyl-5 λ- leu mtl-1 endA1+。
【質(zhì)粒轉(zhuǎn)化步驟】
1.將感受態(tài)細(xì)胞置于冰上解凍，待細(xì)胞解凍后，加入目的質(zhì)粒（含有線性化目的基因）到細(xì)胞中，槍頭輕輕混勻2次；
2.冰上靜置 30 分鐘；
3.42℃熱擊 90 秒鐘；
4.冰上放置 3 分鐘；
5.加入 500μl 無(wú)菌的 LB 培養(yǎng)基；
6.置于 37℃搖床中，100rpm 震蕩復(fù)蘇培養(yǎng) 60 分鐘；
7.復(fù)蘇后5000rpm離心3分鐘，棄掉多余液體留 50-100μl 混勻后涂布在含有卡那霉素抗性的 LB 平板上。待液體涂干后，倒置平板，37℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí)。
【注意事項(xiàng)】
1.感受態(tài)細(xì)胞冰上融化；
2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中輕柔操作；
3.請(qǐng)勿反復(fù)凍融。

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