【產(chǎn)品概述】
基恩科(Gene carer)慢病毒濃縮試液為5×濃縮液,能對所有類型的慢病毒顆粒進(jìn)行簡單快速的濃縮。該試劑盒操作簡單,僅需將僅需將 5×濃縮液與慢病毒上清按比例混合過夜孵育,然后使用普通的離心機(jī)離心,即可得到濃縮的慢病毒顆粒,回收率高達(dá)80% 以上,可濃縮100倍病毒滴度。
【主要組成】
組分 | 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 體積 | 保存 |
組分 | GC231000759 | 慢病毒濃縮液(5×) | 100mL | 4°C |
【自備試劑】:慢病毒病毒上清液
【運(yùn) 輸】:冰袋運(yùn)輸
【實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)】:
1.收集慢病毒上清液,0.45μm濾膜過濾,以除去細(xì)胞和碎片。 【注1】收集上清液時(shí)如果有細(xì)胞脫落或細(xì)胞碎片較多時(shí),需要先離心,1000g離心5min,收集上清。【注2】選擇0.45um低蛋白吸附性的PES濾膜過濾慢病毒上清液。
2.將慢病毒濃縮液按1:4的體積比加入慢病毒上清液中(濃縮液體積:上清液體積=1;4),上下顛倒混勻,放入冰盒中。
3.將冰盒和病毒液放在脫色搖床上進(jìn)行重復(fù)混勻,每30min上下顛倒混勻8-10次,反復(fù)重復(fù)3次。
4.將冰盒和病毒液放在冰箱4°C過夜。
5.Day2,病毒液放于離心機(jī)中,4℃,4000g離心25min,一般可見白色沉淀附著于管壁,可用馬克筆標(biāo)記沉淀位置,不要晃動(dòng)管子,小心去除上清液。
6.用適量體積的DMEM或PBS重懸慢病毒顆粒,小心吹打均勻,盡量不要產(chǎn)生氣泡。
7.將病毒以40~50μL/管分裝,后保存于-80℃。可配套我司慢病毒滴度檢測試劑盒進(jìn)行滴度檢測(貨號:GC230100531【注1】:慢病毒凍存液避免反復(fù)凍融,反復(fù)凍融會降低病毒滴度。【注2】:此病毒液濃縮的病毒可用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn),不可直接用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。